Drittmittelprojekt
Titel:
Kardiovaskuläre Effekte nach Ausschaltung des VASP-Gens durch homologe Rekombination im Mäusemodell
Projektleitung an der Universität Würzburg:
Beteiligte Wissenschaftlerinnen und Wissenschaftler:
- Dr. K.-P. Knobeloch
, FMP Berlin, 12207 Berlin
- Prof. Dr. I. Horak
, FMP Berlin, 12207 Berlin
- Dr. Stepan Gambaryan
,Tel: 0931/201-45954,Fax: 0931/201-45153,Mail: gambarya@klin-biochem.uni-wuerzburg.de
- PD Dr. med. Martin Eigenthaler
,Tel: 0931/201-70080,Fax: 0931/201-45153,Mail: eigentha@klin-biochem.uni-wuerzburg.de
- Wolfgang Hauser
, SFB 355 (TP C8) (bis 12/1999)
- Maisa Ines Garcia Arguinzonis
,Tel: 0931/201-45837,Fax: 0931/201-45153,Mail: mgarcia@klin-biochem.uni-wuerzburg.de
Kurzbeschreibung:
VASP ist das Gründungsmitglied einer prolinreichen Proteinfamilie, die u.a. neben VASP das Drosophila-Protein Enabled (Ena) sowie die Mausproteine Mena (mammalian Enabled) und Evl (Ena-VASP like) umfaßt. Proteine der Ena/VASP-Familie sind wichtige Komponenten der Abl- und Cyclo-Nukleotid-regulierten Signalkaskaden, wobei VASP eine besondere Bedeutung für kardiovaskuläre, Mena für neuronale Zellen hat. Mit dem Ziel, die in-vivo-Funktion von VASP im kardiovaskulären System aufzuklären, wurden in der Förderungsperiode 1999-2001 VASP-defiziente Mäuse generiert, initial phänotypisch charakterisiert, die VASP-Expression in der Maus analysiert sowie VASP-defiziente kardiale Fibroblasten als Zellinie etabliert und zellbiologisch untersucht. Unabhängig von unserer Gruppe etablierte und charakterisierte die Gruppe um R. Fässler (Lund) ebenfalls VASP-defiziente Mäuse. VASP-defiziente Mäuse sind gesund, fertil und charakterisiert durch eine Megakaryozytenhyperplasie sowie durch eine gesteigerte Aktivierung und gestörte NO/cGMP bzw. Prostaglandin/cAMP-vermittelte Hemmung der Thrombozyten. Wie im humanen System ist VASP in der Maus ubiquitär exprimiert, wobei hohe Expressionsspiegel in Thrombozyten, Endothelzellen, glatten Muskelzellen, Immunzellen und der Lunge nachgewiesen wurden. In Kardiomyozyten ist VASP in den Glanzstreifen nachweisbar. Im Vergleich zu VASP-haltigen Zellen zeichnen sich VASP-defiziente kardiale Fibroblasten durch eine veränderte Morphologie und ein verändertes Adhäsions- und Migrationsverhalten aus, was durch die stabile Transfektion von VASP in VASP-defizienten Zellen ausgeglichen werden kann. Diese Untersuchungen unterstützen unsere bisherige Hypothese, daß VASP eine hemmende und möglicherweise protektive Funktion in kardiovaskulären Zellen hat. Zukünftig soll die umfassende kardiovaskuläre Charakterisierung der VASP-knock-out Mäuse abgeschlossen werden und Struktur-Funktionsbeziehungen von VASP auf dem Boden des VASP-defizienten Phänotyps kardialer Fibroblasten und gegebenenfalls weiterer kardiovaskulärer Zellen (z.B. glatte Muskelzellen, Endothelzellen, Megakaryozyten etc.) analysiert werden.
Schlagworte:
Proteinkinasen
Zytoskelett
Thrombozyten
murine Krankheitsmodelle
VASP
Laufzeit:
von 01.1999 bis 12.2001
Förderinstitution:
DFG
Publikationen:
- Garcia Arguinzonis MI, Galler AB, Walter U, Reinhard M, Simm A.
(2002). Increased spreading, Rac/p21-activated kinase (PAK) activity, and compromised cell motility in cells deficient in vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP). J Biol Chem. in press, (Wissenschaftl. Artikel)
- Marienfeld U, Walter U, and Simm A.
(2001). Inhibition of rat cardiac fibroblast growth by cAMP- but not by cGMP-dependent protein kinase. . Basic Res Cardiol 96, (Wissenschaftl. Artikel)
- Gambaryan S, Hauser W, Kobsar A, Glazova M, Walter U.
(2001). Distribution, cellular localization, and postnatal development of VASP and Mena expression in mouse tissues. Histochemistry and Cell Biology 116, (Wissenschaftl. Artikel)
- Ball LJ, Kühne R, Schmieder S, Hoffmann S, Volkmer-Engert R, Schnieder-Mergener J, Häfner A, Hof M, Wahl M, Walter U, Oschkinat H, Jarchau T.
(2000). . Dual epitope recognition by the VASP EVH1 domain controls polyproline ligand specificity and binding affinity. EMBO J. 19, (Wissenschaftl. Artikel)
- Smolenski A, Poller W, Walter U, and Lohmann SM.
(2000). Regulation of human endothelial cell focal adhesion sites and migration by cGMP-dependent protein kinase I. J Biol Chem 275, (Wissenschaftl. Artikel)
- Becker EM, Schmidt P, Schröder H, Walter U, Hoenicka M, Gerzer R, Stasch J-P.
(2000). The vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP) : mediator of YC-1 and NO effects in human and rat platelets. J Cardiovascular Pharmacol 35, (Wissenschaftl. Artikel)
- Bachmann C , Fischer L , Walter U , Reinhard M.
(1999). The EVH2 Domain of the Vasodilator-Stimulated Phosphoprotein (VASP) Mediates Tetramerization and F-actin Binding and Bundling. J Biol Chem 274, (Wissenschaftl. Artikel)
- Hauser W, Knobeloch K-P, Eigenthaler M, Gambaryan S, Krenn V, Geiger J, Glazova M, Rohde E, Horak I, Walter U , Zimmer M..
(1999). Megakaryocyte hyperplasia and enhanced agonist-induced platelet activation in vasodilator stimulated phosphoprotein-(VASP) knock-out mice. Proc Natl Acad Sci USA 96, (Wissenschaftl. Artikel)
- Ball LJ, Jarchau T, Oschkinat H, Walter U.
(2002). EVH 1 domains: structure, function and interactions. (Sonstiges)
- Schwarz UR, Walter U, Eigenthaler M.
(2001). Taming platelets with cyclic nucleotides. 2001. Biochem Pharmacol 62: 1153-1161. (Sonstiges)
- Reinhard M, Jarchau T, Walter U.
(2001). . Actin-based motility: stop and go with Ena/VASP proteins. (Sonstiges)
Links:
Institut für Klinische Biochemie und Pathobiochemie, Universität Würzburg
Sonderforschungsbereich 355
